貨號(hào):10471-1, 包裝:4x100ML,價(jià)格:180元

英文名稱:GRAM Micro-OrganismsStaining Solution
革蘭氏染色試劑盒
產(chǎn)品組成:
4x100ML | |||
10471-1A | 草酸銨結(jié)晶紫染液 | 100ML | RT |
10471-1B | 革蘭氏碘液 | 100ML | RT |
10471-1C | 脫色液 | 100ML | RT |
10471-1D | 番紅復(fù)染液 | 100ML | RT |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒定染色法,媒染劑碘液進(jìn)入菌體后與結(jié)晶紫結(jié)合,革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)碘與結(jié)晶紫攝取量最多且牢固,不易被酒精脫色,革蘭氏陰性菌對(duì)碘與結(jié)晶紫攝取量少且不牢固,易被酒精脫色。為觀察方便,脫色后再用一種紅色染料,如堿性番紅進(jìn)行復(fù)染。陽(yáng)性菌仍為紫色,陰性菌則被染為紅色。
實(shí)驗(yàn)操作:
A---準(zhǔn)備
1---使用無(wú)菌接種環(huán),挑取一薄層樣品置于載玻片上并涂片。接種環(huán)通過(guò)酒精燈火焰灼燒而達(dá)到無(wú)菌,使用前可以冷卻30s,如果檢測(cè)的組織樣品可能被細(xì)菌污染,或者在培養(yǎng)基中有細(xì)菌生長(zhǎng),可直接用接種環(huán)挑取樣品并置于載玻片上;如果檢測(cè)培養(yǎng)板上生長(zhǎng)的細(xì)菌克隆,可現(xiàn)在載玻片上滴加一滴無(wú)菌水,然后挑取一個(gè)克隆,并將其置于水中。
2---使涂片自然干燥,熱固定,在酒精燈的火焰上路過(guò)2-3次。
注意:不要將載玻片持續(xù)置于火焰上,以免樣品過(guò)熱。
B---染色
1---將熱固定后載玻片置于裝有草酸銨結(jié)晶紫染液的染缸中,使載玻片在染缸中站立1min,
2---使用自來(lái)水輕輕洗載玻片5s,抖掉多余的水。
3---將載玻片置于裝有革蘭氏碘液的染缸中1min,水洗,并抖掉多余的水。
C---脫色和復(fù)染
1---略微傾斜載玻片,將脫色液滴加在載玻片上端,使其下滑通過(guò)樣品區(qū),直至紫色出現(xiàn)為止,重要的是,脫色既不能過(guò)度也不能不足,如果脫色過(guò)度,可將革蘭氏陽(yáng)性菌誤判為陰性菌;如果脫色不足,可將革蘭氏陰性菌誤判陽(yáng)性菌。
2---水洗5s,抖掉多余的水分。
3---使用番紅復(fù)染液染色1min。
4---水洗5s,抖掉多余的水分,允許其自然干燥,或者用吸水紙小心的將水分吸干。
D---鏡檢
在油鏡(900x-1000x)下觀察細(xì)菌以區(qū)分革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌。不要使用蓋玻片,在載玻片中間加一滴油觀察細(xì)菌,如果需要,載玻片可保存于載片盒中數(shù)月再觀察。
染色結(jié)果:
革蘭氏陽(yáng)性菌---藍(lán)紫色,革蘭氏陰性菌---紅色。
注意事項(xiàng):
1---革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握脫色程度,菌種也影響染色結(jié)果,如陽(yáng)性菌培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),或已死亡及部分菌自行溶解,都常呈陰性反應(yīng)。
2---標(biāo)本涂片不能太厚。
3---玻片通過(guò)火焰溫度不能過(guò)高。
4---若涂片較厚,延長(zhǎng)脫色時(shí)間,直至不再出現(xiàn)紫色為止。
5---碘液變透明,則不能使用。
6---水洗時(shí)動(dòng)作要輕柔,沿載玻片對(duì)角線方向用洗瓶沖洗,以免把菌體沖掉。
7---第一次使用本品時(shí),建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
溫馨提示:
為了您的自身安全,使用本品前,請(qǐng)做好防護(hù)!