貨號(hào)：10432-1， 包裝：1ML，價(jià)格：500元
貨號(hào)：10432-2， 包裝：5x1ML，價(jià)格：1500元
英文名稱：Pro-plus PCR MIX
Pro-plus PCR MIX
【產(chǎn)品概述】
Pfu DNA Polymerase簡(jiǎn)稱Pfu酶，是最常用的高保真DNA聚合酶之一。Pfu酶可以催化5'至3'方向的依賴于DNA模板的脫氧核苷酸的聚合。和Taq酶不同，Pfu酶有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity)。另外，Pfu酶有5'至3'外切酶活性，但Pfu酶沒有反轉(zhuǎn)錄酶活性。
由于Pfu酶有3'至5'的外切酶活性，因此在PCR擴(kuò)增過程中出錯(cuò)的幾率大大降低，因此Pfu酶常作為首選的高性價(jià)比的高保真DNA聚合酶。
【產(chǎn)品組分】
組分 | PD-001 50 rxns （20 ul/rxn） | 保存條件 |
高保真PCR MIX | 500 μl | -20 ℃ |
【PCR 反應(yīng)鑒定】
一、PCR 反應(yīng)體系
組分 | 推薦用量 |
高保真PCR MIX | 10 μl |
Forward Primer(10uM) | 0.5 μl |
Reverse Primer (10uM) | 0.5 μl |
裂解產(chǎn)物（DNA模板） | 1 μl |
ddH2O | 補(bǔ)足至20 μl |
注：各組分使用前應(yīng)充分混勻。
1. 推薦使用20 μl，也可根據(jù)使用習(xí)慣調(diào)整體系體積大小。
2. 在冰上準(zhǔn)備反應(yīng)混合液，配制好PCR反應(yīng)體系，置于渦旋儀上渦旋混勻，瞬時(shí)離心將反應(yīng)液集于管底。
3. 將PCR管放入PCR儀后立即開始熱循環(huán)反應(yīng)。
二、PCR 反應(yīng)條件
步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 98 ℃ | 3 min | 1 cycle |
變性 | 98 ℃ | 10 sec | 30 cycles |
退火 | 56 ℃ | 10 sec | |
延伸 | 72 ℃ | 30 sec/Kb | |
終延伸 | 72 ℃ | 2 min | 1 cycle |
*退火溫度：請(qǐng)參考引物的理論Tm值，退火溫度可設(shè)置低于引物理論值2-5 ℃，或通過梯度PCR確定最佳溫度。
【注意事項(xiàng)】
1. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防護(hù)性措施進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
2. 本產(chǎn)品僅作科研用途！