貨號:10420-1, 包裝:100ML,價格:280元

英文名稱:RNAstore Reagent
RNAstore樣本保存液
RNAstore Reagent
產品簡介:
RNAstore是一種液態(tài)的,無毒的組織保存試劑,它能迅速滲入組織細胞中,通過抑制RNase活性從而保護非冷凍細胞RNA于原位,使其更適合于組織基因表達譜的分析,獲得組織塊后,迅速浸泡在RNAstore中保存,而不會引起RNA的降解,這樣可以不必馬上處理樣本,也不必將樣本冷凍在液氮中,RNAstore可廣泛應用于多種脊椎動物樣本,包括腦,心,腎,脾,肝,肺和胸腺。
推薦不同組織樣品的RNAstore使用量:
大鼠的不同組織 | 組織重量(mg) | RNAstore的使用量(ml) |
腎 | 100-500 | 1-5 |
脾 | 100-300 | 1-3 |
肺 | 100-300 | 1-3 |
心 | 100-170 | 1-1.7 |
肝 | 100-1000 | 1-10 |
新鮮非冷凍組織按1:10比例浸入RNAstore后,常溫1周--37℃1天,4℃至少保存1個月,組織4℃浸泡過夜后-20℃或-80℃長期保存,RNAstore保存的組織可以反復凍融至少20次。
注意事項:請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項
1--RNAstore只能用于新鮮組織,在浸入RNAstore之前不能冷凍組織。
2--要求組織樣本任何一邊的最大厚度不能大于0.5cm,然后將組織塊放入到10倍體積的RNAstore中保存。如果組織樣品厚度過大,RNAstore滲入組織樣本中速度將會減慢造成RNA降解,所以如果厚度超過0.5cm需簡單切碎組織后再在RNAstore中貯存。
3--該試劑不適合于保存植物葉片,其表面的蠟表皮使RNAstore很難完全滲入組織中。
4--對于組織培養(yǎng)細胞的操作,先沉淀細胞,用PBS洗一次,再用少量的PBS懸浮細胞,然后加入2倍體積的RNAstore保存,后續(xù)RNA的提取可以采用直接離心去除RNAstore后進行RNA提取,也可以不用去除RNAstore直接加入RNA提取裂解液進行直接提取。
離心法:因為RNAstore的介質濃度比典型的細胞培養(yǎng)介質濃度高,因此用通常沉淀活細胞的離心力無法沉淀RNAstore中的細胞,離心沉淀細胞,去除RNAstore,至少需要5000×g的以上的離心力。
直接提取法:通過向細胞混合物中加入10倍體積的RNA提取試劑來完成。
5--對于細菌操作,先離心收集細菌,用PBS洗一次,再用少量的PBS懸浮細胞,加入2倍體積的RNAstore保存,后續(xù)RNA的提取參照組織細胞的提取步驟,大腸桿菌保存在RNAstore中4℃條件下1個月仍很完整,產生的不降解的RNA.
6--對于全血中的白細胞保存,需將白細胞從紅細胞和血清中分離出來,并按組織培養(yǎng)細胞一樣處理后,白細胞便能有效地保存在RNAstore中,不要將全血,血漿或血清中的RNA保存在RNAstore中,因為它們的蛋白含量高,與RNAstore混合后易形成不溶的沉淀。
操作步驟:
1--切割組織前估計加入RNAstore中的組織重量,并根據加入至少10倍體積組織的量確定RNAstore的使用量(譬如:組織100mg,需加入1mlRNAstore)
2--切割組織后放入RNAstore中,如果組織樣本過大需剪切橙任何一邊的最大厚度不能大于0.5cm。
注意:為了安全有效的保護組織樣本,該組織樣本應完全浸沒入RNAstore中,并且組織樣本的任何一邊的最大厚度不應超過0.5cm。
3--貯存于RNAstore中的樣品組織4℃可至少保存1個月,室溫1周,37℃1天。對于-20℃或-80℃長期保存,先將樣本在4℃條件下過夜?jié)B透,然后將組織從RNAstore中取出后放入-20℃或-80℃長期保存,樣本可隨后在室溫下解凍及再凍存,其RNA的質和量都不會受影響。
注意:建議組織樣品在RNAstore中低溫保存(4℃可至少保存1個月,-20℃或-80℃長期保存),不建議37℃或室溫保存,凍存于-20℃或-80℃的組織可反復凍融至少20次不影響RNA提取,保存于RNAstore中的組織如果需要長途運輸,運輸過程中需要確保組織完全浸入RNAstore中。
4--從RNAstore中取出樣品就可以用RNA提取試劑盒,直接提取RNA.
保存溫度:
RT(如溶液產生沉淀或晶體析出,用之前需37℃完全溶解沉淀,不影響效果)