貨號(hào)：10311-1， 包裝：5ML，價(jià)格：120元
產(chǎn)品別名：含DAPI的抗熒光淬滅封片液
英文名稱： Mounting Medium, antifading (with DAPI)
英文別名： Mounting Medium, antifading (with DAPI)
含DAPI的抗熒光淬滅封片液
產(chǎn)品簡介：該試劑盒中的DAPI的濃度為0.4ug/ML。
藍(lán)色熒光DAPI常用于細(xì)胞核染色，優(yōu)先與雙鏈DNA結(jié)合，可與小溝中的AT結(jié)合，DAPI與雙鏈DNA結(jié)合后，由于DAPI和小溝中的水分子被置換，可產(chǎn)生20倍的熒光強(qiáng)度，DAPI亦可與RNA結(jié)合，但結(jié)合的模式不同，DAPI/RNA復(fù)合體與DAPI/DNA復(fù)合體相比，發(fā)射波長較長（前者500nm，后者460nm），在多色熒光染色技術(shù)中，DAPI也是較常用的核復(fù)染劑，其藍(lán)色熒光可與綠色，黃色或紅色形成鮮明的對(duì)比，DAPI可特異性的染核，幾乎不標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)。
抗熒光淬滅封片液是一種用于減緩熒光淬滅的封片試劑，可以用于減緩各種常見熒光染料的熒光淬滅。
操作流程：1---貼壁細(xì)胞的復(fù)染
a---樣品準(zhǔn)備，使用恰當(dāng)?shù)墓潭▌┕潭悠?，一般情況下，最后用DAPI對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。
b---復(fù)染流程。用PBS短暫平衡樣品，加入適量的DAPI染液，保證所有的細(xì)胞均被覆蓋，孵育3-5min，用PBS漂洗樣品數(shù)次，用吸水紙將多余的液體吸干，用配有恰當(dāng)濾片的熒光顯微鏡觀察樣品。
2---懸浮細(xì)胞的復(fù)染
a---樣品準(zhǔn)備，收集懸浮細(xì)胞2×105---1×106個(gè)細(xì)胞，通過離心，使細(xì)胞沉淀，棄上清。輕彈試管，使沉淀在剩余的液體中重懸，在加入1MLPBS,將細(xì)胞懸液緩慢的加入4ML的乙醇中，同時(shí)以最大的速度渦旋，將含有細(xì)胞的乙醇在-20℃放置5-15min，通過離心，使細(xì)胞沉淀，棄上清，輕彈試管，使沉淀松散，在加入5ML的PBS.
b---復(fù)染流程，離心使細(xì)胞沉淀，棄上清，輕彈試管，使沉淀松散，加入2-3ML DAPI染液，室溫下孵育15min，如果使用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞，將樣品離心后，棄上清，用新鮮的緩沖液重懸沉淀，在顯微鏡載玻片上滴加一滴細(xì)胞懸液，加蓋片后觀察。
注意事項(xiàng)：
a---熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，染色后的樣品宜避光保存，在使用抗熒光淬滅封片液的情況下，可以減少淬滅，但仍宜盡量避光。
b---它是流動(dòng)性較好的封片液，在封片后蓋玻片和載玻片不會(huì)完全沾粘，但不會(huì)影響常規(guī)的熒光觀察，如希望把蓋玻片和載玻片沾粘在一起，可在蓋玻片的四周用指甲油進(jìn)行封閉和沾粘。
c---第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
溫馨提示：
為了您的自身安全，使用試劑前，請做好防護(hù)，如穿實(shí)驗(yàn)服，帶手套等。
保存條件：-20℃避光保存