貨號:10190-1, 包裝:100ML,價格:120元

產(chǎn)品別名:DAPI 染液
英文名稱:DAPI 染液
英文別名:DAPI 染液
DAPI染液
產(chǎn)品簡介:該染液的濃度為2.9uM,非無菌液體。即用型染液。
藍色熒光DAPI常用于細胞核染色,優(yōu)先與雙鏈DNA結(jié)合,可與小溝中的AT結(jié)合,DAPI與雙鏈DNA結(jié)合后,由于DAPI和小溝中的水分子被置換,可產(chǎn)生20倍的熒光強度,DAPI亦可與RNA結(jié)合,但結(jié)合的模式不同,DAPI/RNA復(fù)合體與DAPI/DNA復(fù)合體相比,發(fā)射波長較長(前者500nm,后者460nm),在多色熒光染色技術(shù)中,DAPI也是較常用的核復(fù)染劑,其藍色熒光可與綠色,黃色或紅色形成鮮明的對比,DAPI可特異性的染核,幾乎不標記細胞質(zhì)。
操作流程:1---貼壁細胞的復(fù)染
a---樣品準備,使用恰當?shù)墓潭▌┕潭悠?,一般情況下,最后用DAPI對細胞進行染色。
b---復(fù)染流程。用PBS短暫平衡樣品,加入適量的DAPI染液,保證所有的細胞均被覆蓋,孵育3-5min,用PBS漂洗樣品數(shù)次,用吸水紙將多余的液體吸干,用配有恰當濾片的熒光顯微鏡觀察樣品。
2---懸浮細胞的復(fù)染
a---樣品準備,收集懸浮細胞2×105---1×106個細胞,通過離心,使細胞沉淀,棄上清。輕彈試管,使沉淀在剩余的液體中重懸,在加入1MLPBS,將細胞懸液緩慢的加入4ML的乙醇中,同時以最大的速度渦旋,將含有細胞的乙醇在-20℃放置5-15min,通過離心,使細胞沉淀,棄上清,輕彈試管,使沉淀松散,在加入5ML的PBS.
b---復(fù)染流程,離心使細胞沉淀,棄上清,輕彈試管,使沉淀松散,加入2-3ML DAPI染液,室溫下孵育15min,如果使用熒光顯微鏡觀察細胞,將樣品離心后,棄上清,用新鮮的緩沖液重懸沉淀,在顯微鏡載玻片上滴加一滴細胞懸液,加蓋片后觀察。
注意事項:
1---需一臺可觀察藍色熒光的熒光顯微鏡或激光共聚顯微鏡。
2---需自備PBS,固定液及抗熒光淬滅封片液。
3---第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預(yù)實驗。
溫馨提示:
為了您的自身安全,使用試劑前,請做好防護,如穿實驗服,帶手套等。
保存條件:
-20℃避光保存