貨號:10204-1, 包裝:50T,價格:158元

產(chǎn)品別名:PAGE彩色凝膠試劑盒
英文名稱:PAGE Gel Quick Preparation Kit
英文別名:PAGE
改進型PAGE-彩色凝膠配制試劑盒使用說明書
產(chǎn)品簡介
改進型PAGE-彩色凝膠配制試劑盒提供了配制PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水即可配制。本產(chǎn)品保留了傳統(tǒng)PAGE凝膠配制試劑盒的操作習(xí)慣,但又具備諸多優(yōu)勢:1、配膠速度快,只需20min以內(nèi)便可配制1塊PAGE膠;2、無需額外加入TEMED,避免了其氣味引起的不適;3、蛋白轉(zhuǎn)印條帶更清晰;4、不含SDS成份,可用于配制變性和非變性PAGE凝膠;5、改良過硫酸銨引發(fā)效率更高更穩(wěn)定,使用更便捷。
使用方法
不同分離膠(下層膠,pH 8.8)濃度分離范圍:
分離膠濃度 | 最佳分離范圍 |
6% | 50-150kD |
8% | 30-90kD |
10% | 20-80kD |
12% | 12-60kD |
15% | 10-40kD |
將配膠板洗凈、晾干后,按要求裝在配膠夾具上,配膠底板和蓋板底面一定平行,以防止漏膠。不同濃度、體積分離膠按下表配制好后,灌入配膠板內(nèi),再加入水或異丙醇至蓋板口。
膠濃度 | 組份名稱 | 膠體積5mL | 膠體積10mL | 膠體積15mL | 膠體積20mL |
6% | 水 30%Acr-Bis 分離膠緩沖液 改良過硫酸銨 | 2.75 1.0 1.25 0.015-0.05 | 5.5 2.0 2.5 0.03-0.1 | 8.25 3.0 3.75 0.045-0.15 | 11 4.0 5.0 0.06-0.2 |
8% | 水 30%Acr-Bis 分離膠緩沖液 改良過硫酸銨 | 2.42 1.33 1.25 0.015-0.05 | 4.8 2.7 2.5 0.03-0.1 | 7.25 4.0 3.75 0.045-0.15 | 9.7 5.3 5.0 0.06-0.2 |
10% | 水 30%Acr-Bis 分離膠緩沖液 改良過硫酸銨 | 2.08 1.67 1.25 0.015-0.05 | 4.17 3.33 2.5 0.03-0.1 | 6.25 5.0 3.75 0.045-0.15 | 8.3 6.7 5.0 0.06-0.2 |
12% | 水 30%Acr-Bis 分離膠緩沖液 改良過硫酸銨 | 1.75 2.0 1.25 0.015-0.05 | 3.5 4.0 2.5 0.03-0.1 | 5.25 6.0 3.75 0.045-0.15 | 7.0 8.0 5.0 0.06-0.2 |
15% | 水 30%Acr-Bis 分離膠緩沖液 改良過硫酸銨 | 1.25 2.5 1.25 0.015-0.05 | 2.5 5.0 2.5 0.03-0.1 | 3.75 7.5 3.75 0.045-0.15 | 5.0 10.0 5.0 0.06-0.2 |
待分離膠凝固后,棄去上層水或異丙醇(棄去后可用濾紙將殘余液體吸干),灌入按下表配制的濃縮膠(上層膠,pH 6.8)至略高過板口,再插入樣品梳,凝膠后即可。
組分名稱 | 2mL | 4mL | 6mL | 8mL |
水 30%Acr-Bis 濃縮膠緩沖液 改良過硫酸銨 | 1.14 0.34 0.5 0.02 | 2.28 0.68 1.0 0.04 | 3.42 1.02 1.5 0.06 | 4.56 1.36 2.0 0.08 |
預(yù)混膠配制 根據(jù)需要的膠濃度和體積,按分離膠、濃縮膠配制表比例將水、30%Acr-Bis、分離膠(或濃縮膠)緩沖液混合好后(不要加入過硫酸銨),裝入棕色瓶中。例如:1次制膠使用8%分離膠溶液5mL,10塊膠共50mL。配制時,按水24.2mL、30% Acr-Bis 13.3mL、分離膠緩沖液12.5mL混合后即為8%分離預(yù)混膠溶液50mL,裝入棕色瓶中4℃保存,濃縮膠預(yù)混液配制方法相同。配好的預(yù)混膠請在三天內(nèi)用完。
注意事項
1、采用的改良過硫酸銨溶液具有更高的穩(wěn)定性和引發(fā)能力,使用后4℃可穩(wěn)定存放3個月效果幾乎不衰減,長期保存需放入-20℃。
2、過久存放出現(xiàn)不凝膠問題,需額外加入TEMED。
3、室溫條件下配制分離膠時,過硫酸銨推薦用量為0.02mL(預(yù)混膠可適量增加)。由于氣溫原因引起的凝膠速度變化,可通過調(diào)節(jié)APS的用量加以調(diào)整,凝膠時間控制在3-5min即可。
4、本試劑盒凝膠速度快,如一次需要連續(xù)配制數(shù)塊膠時,可通過控制APS用量來控制凝膠時間。也可先配制成預(yù)混膠,倒出1塊膠需要的體積,再加入過硫酸銨溶液后灌膠,以防因凝膠速度快引起的無法灌膠或凝膠分界線扭曲的問題。
5、配制變性PAGE凝膠無需加入SDS。進行非變性PAGE電泳時,因蛋白酸堿性不同造成實驗要求有差別,請根據(jù)具體實驗情況選用。本試劑盒濃縮膠pH 6.8。
6、本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
7、配套我公司的快速電泳緩沖液使用,10-150KD的蛋白分子量推薦凝膠濃度為7%
產(chǎn)品規(guī)格
30%Acr-Bis 100mL 1瓶,分離膠緩沖液(pH 8.8)70mL 1瓶,彩色濃縮膠緩沖液(pH 6.8)30mL 1瓶,改良過硫酸銨 5mL 1瓶。
貯存條件
4℃保存,有效期1年。
使用建議:建議配合我公司快速電泳緩沖液和快速轉(zhuǎn)膜緩沖液使用,可以大大縮短實驗時間,建議電泳電壓 150V 或 240V,這樣可以縮短電泳時間,且不會影響蛋白marker實驗分布結(jié)果!